黑素細胞及其腫瘤

　　一、正常黑素細胞

　　人類黑素細胞主要分布于表皮基底層。表皮黑素細胞起源于神經(jīng)嵴。HE染色的切片中，黑素細胞核小濃染，胞漿透明，約10個基底細胞中可見一個。能確定黑素細胞的方法有透射電鏡觀察及多巴染色。免疫細胞化學(xué)染色目前僅以抗S-100蛋白抗體著染有一定參考意義，根據(jù)其位于基底層一般可判斷其系黑素細胞，但有時Langerhan氏細胞也可存在于基底層，而且我們在應(yīng)用中還發(fā)現(xiàn)，不少皮內(nèi)痣未累及表皮的黑素細胞作S-100蛋白染色時，表皮基底層未能顯示陽性的黑素細胞。中間絲系列中，黑素細胞波形纖維蛋白陽性。此外，黑素細胞尚可表達黑素小體相關(guān)抗原(HMSA)、一些神經(jīng)苷酯、P97等黑素瘤相關(guān)抗原，但極微弱。

　　二、色素痣

　　色素痣可表達與黑素細胞相同的抗原，且通常較強。1987年Nakanish等曾克隆出一析僅與色素痣而不與正常黑素細胞及黑素瘤細胞反應(yīng)的單抗TNKH1，由于未見進一步的研究，尚不能認為色素痣中存在一種特異抗原。

　　三、惡性黑素瘤

　　惡性黑素瘤主要起源于表皮黑素細胞，少數(shù)起源于色素痣、真皮等。在黑素細胞及其腫瘤中，表皮黑素細胞最為成熟，除分化抗原外，表達的抗原少，色素痣特別是交界痣處于較低的增殖狀態(tài)，表達的抗原較多，惡性黑素瘤分化最低，增生活躍，除能表達正常黑素細胞及痣細胞所表達的抗原外，尚能表達一些特殊的黑素瘤相關(guān)抗原，或表達強度遠高于正常黑素細胞及痣細胞。

　　近10余年來，已克隆出許多株黑素瘤相關(guān)抗原的抗體，但至今尚未發(fā)現(xiàn)一種真正的黑素瘤特異抗原，有的單抗雖具有很高的特異性及敏感性，如兩伯稱2-139-1及6-26-3的單抗，黑素瘤陽性率26/26，呈強陽性或中度陽性，22例色素痣僅1列交界痣可疑陽性，然而近10年的文獻跟蹤未見進一步的深入研究。

　　在眾多的黑素瘤相關(guān)抗原中，以P97、神經(jīng)節(jié) 苷酯、HMB45研究得較深入。診斷應(yīng)用中應(yīng)用最多的是HMB45,Gown等以ABC法觀察了60例惡性黑素瘤，僅2例陰性，交界部痣細胞陽性6例，皮內(nèi)痣及30種168例非黑素細胞性腫瘤全部陰性。最近的免疫電鏡觀察顯示，HMB45抗原定位于黑素化不完全的黑素小體或稱異常黑素小體上。由于大樣本量的電鏡觀察發(fā)現(xiàn)少數(shù)先天性痣的皮內(nèi)痣中可以有異常黑素小體，另一方面少數(shù)黑素瘤中不一定存在異常黑素小體，所以應(yīng)用HMB45時，除需注意交界部的陽性對黑素細胞腫瘤的良惡性鑒別無意義外，皮內(nèi)損害中的陽性與陰性亦應(yīng)結(jié)合HE切片進行分析。

　　神經(jīng)節(jié) 苷酯(Ganglioside)是一類帶唾液酸的鞘糖酯，按糖基中唾液酸的數(shù)目分為單、二、三、四唾液酸神經(jīng)節(jié) 苷酯，分別簡稱GM、GD、GT和GQ，每種神經(jīng)節(jié) 苷酯還可根據(jù)薄板層析遷移率Rf值的大小再分幾個亞類，如GD1、GD2、GD3等。神經(jīng)組織、黑素細胞等含很微量神經(jīng)節(jié) 苷酯，細胞惡變過程中往往伴有神經(jīng)節(jié) 苷酯的改變，其改變程度與腫瘤的惡性程度和轉(zhuǎn)移有關(guān)。黑素瘤細胞表達大量GD3、GM3，25%原發(fā)和50%轉(zhuǎn)移性黑素瘤還表達GD2。研究表明，惡性黑素瘤與正常黑素細胞所表達的神經(jīng)節(jié) 苷酯的結(jié)構(gòu)是相同的，一些神經(jīng)節(jié) 酯的單抗只與黑素瘤結(jié)合，不與正常黑素細胞、神經(jīng)組織結(jié)合，可能是由于含量的差異所致，另外可能與神經(jīng)節(jié) 苷酯在細胞表面的暴露程度有關(guān)。GM3已被稱為黑素瘤的跨種抗原，但GD3較GM3更具特異性，因兩者在正常黑素細胞中的比值GM3：GD3為18：1，在黑素瘤中GM3：GD3為1：15。

　　目前針對神經(jīng)節(jié) 苷酯的單抗有數(shù)10株，各株的抗原結(jié)合特性有一定差異，較早的一株名為R24的抗原為GD3，除與黑素瘤、星形細胞瘤反應(yīng)外，與其它一些惡性腫瘤及少數(shù)正常組織亦有反應(yīng)。國內(nèi)引進的一株名為Mel3的雜交瘤所針對的抗原為GD2、GT3、GD3、GQ16，10例黑素瘤組織細胞100%強陽性或中度陽性，4/7例色素痣的部分細胞弱陽性或中度陽性，4/14例表皮黑素細胞呈極弱反應(yīng)，胎肝以外的其它胚胎組織陰性。田芳等用該單抗所染結(jié)果與前述相類似。

　　P97抗原是一膜結(jié)合的轉(zhuǎn)鐵蛋白樣分子，黑素瘤細胞膜上含量很高。現(xiàn)已克隆出P97分子cDNA并制備成分子疫苗，但應(yīng)用前景尚不明。對P97的研究主要是應(yīng)用放免法，很少應(yīng)用免疫組化方法。

　　S-100蛋白、波形纖維蛋白雖不象一些黑素瘤相關(guān)抗原那樣具有高特異性，但其應(yīng)用范圍廣，易獲得，所以此二種蛋白的抗體在黑素瘤鑒別診斷中應(yīng)用最普遍。我們對68例病理確診或疑診的黑素瘤組織進行染色，結(jié)合抗角蛋白抗體標染，HE切片觀察等，否定了11例的診斷，余57例S-100蛋白及波形纖維蛋白均陽性。根據(jù)此觀察，筆者認為：在HE切片觀察基礎(chǔ)上，排除一些神經(jīng)性腫瘤、組織細胞增生癥X、色素痣，S-100蛋白及波形纖維蛋白均陽性，能肯定惡性黑素瘤診斷，兩抗體均陰性能否定診斷。

　　NSE在黑素瘤中的表達率較低，染色弱，在黑素瘤鑒別診斷中實用意義不大。

（大眾醫(yī)藥）